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生物医学实验中,常常需要从液体样品(如血浆,培养基)中纯化病毒,但由于病毒颗粒十分细小,传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来,此操作非常繁琐,并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点,本公司开发了本产品。
中文名称:柱式真菌DNA大量提取试剂盒(玻璃珠法)
英文名称:Fungus DNA Column large-scale extraction kit(Glass bead method)
产品规格:4次
发货周期:1~3天
产品货号:BJ-F0163397
产品介绍:
本试剂盒在柱式真菌(BTN70901)基础上改良而得大提升级产品,主要用于大量快速从各种真菌材料中提取基因组DNA。 产品特点: 1.处理量大,一次可以处理1-3g 各种真菌组织。 2. 纯度高,OD260/280一般在1.8以上。不含污染和抑制剂,得到的DNA可以不经稀释直接用于酶切、PCR、real-timePCR、multiplex PCR、RAPD、RELP、AFLP、Southern Blotting,microsatellite analysis等各种后续分子生物学实验。 3. 采用玻璃珠法破碎细胞,属于物理方法,远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好,也不容易带入外援真菌DNA。 4.产率一般在10-100μg/g真菌样品。离心吸附柱大吸附量为800μg。 5. DNA片段长度一般在20-40kb左右。 6.适用范围广,适用于度大多数真菌材料,包括酵母(S.cerevisiae、S.pomb、Pichia pastoris)等。 储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。 使用方法: 1. 对菌液:取60-100mL 过夜培养的真菌菌液(OD600一般在1以上)到干净的塑料离心管中,12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。 2. 对菌落:用接种针在在培养基上刮取尽可能多的真菌菌落(约1 g),转移到装有20mL 无菌水的干净的塑料离心管中,洗涤下接种环上的菌体。12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。 3. 对孢子材料,一般取1-3g左右,直接加入到离心管中,在材料中加入无菌水20mL,振荡半分钟后12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。 4.沉淀中加入10mL溶液A和10 克的玻璃珠,涡旋震荡10分钟,可以延长震荡时间。 5. 加入10mL的溶液B,涡旋震荡5分钟,12000rpm离心2分钟,将上清液全部转移到一个50mL的干净的塑料离心管中。 6.在上清中加入3倍体积的溶液C,颠倒数次混匀后,分三次上离心吸附柱,每次上柱后均先室温放置2分钟,然后12000rpm离心1分钟,倒掉穿透液,再次上柱,重复上面的操作,直到挂柱步骤完成。 7. 将20mL 通用洗柱液加入离心柱,12000rpm离心1分钟,弃穿透液。 8. 重复上步操作一次。 9. 12000rpm 空甩1分钟去除残留液体。 10. 将离心柱放置在一新的50mL塑料离心管中,加入500μL DNA 洗脱液2.0。 11.室温放置5分钟后12000rpm离心1分钟,管底即为真菌DNA样品,吸取离心管中的DNA溶液重新滴加在吸附柱上,离心洗脱以收集更多的DNA。 12. 所得DNA可立即使用,也可长期保存在-20℃。 13. 注:如离心机转速不能达到12000rpm,可以用大转速离心10-15min 代替12000rpm离心1-2min。 |
使用方法:本产品仅用于科研
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)。
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一级容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由专人(2人)运送,不得邮寄,最好使用专车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存最好在-70℃温度以下进行。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
植物F型氢ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒
动物细胞P型ATP酶(P type ATPase)活性比色法定量检测试剂盒
动物组织P型ATP酶(P type ATPase)活性比色法定量检测试剂盒
细菌P型ATP酶(P type ATPase)活性比色法定量检测试剂盒
酵母P型ATP酶(P type ATPase)活性比色法定量检测试剂盒
Rat angiopoietin 1 (ANG-1) ELISA Kit 大鼠生成素1(ANG-1)elisa 1-Naphthol 90-15-3 中文名: 分子式:C10H8O Rat angiogenin (ANG) ELISA Kit 大鼠生长素(ANG)elisa 2-(2-Aminothiazole-4-yl)-2-methoxyiminoacetic acid 中文名:氨噻肟酸 分子式:C6H7N3O3S
rabbitThyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit 兔子促甲状(TSH)elisa 96T/48T 进口分装 22-Dehydroclerosterol glucoside 中文名: 分子式:C35H56O6 度:%
rabbittelomerase,TEELISAKit 兔子端粒酶(TE)elisa 96T/48T 进口分装 2,2'-Dithiobisbenzanilide 中文名:2,2'-二苯甲酰氨基二苯二硫 分子式:C26H20N2O2S2 度:98.0%
rabbitplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit 兔子纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)elisa 96T/48T 进口分装 2-[2-(2,2,2-Trifluoroethoxy)phenoxy]ethyl methanesulfonate 160969-03-9 中文名: 分子式:C11H13F3O5S 度:98.0% 关键词:
柱式真菌DNA大量提取试剂盒(玻璃珠法)黄柏酮 Obacunone 质量规格:HPLC≥98%,标准品 人末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)ELISA检测试剂盒Humaerminaldeoxynucleotidylansferase,TdTELISAKit 96T/48T
黄豆黄苷 Glycitin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 大鼠铜蓝蛋白(CP)试剂盒 Rat ceruloplasmin(ferroxidase)(CP)ELISA kit
黄豆黄素 Glycitein 质量规格:HPLC≥98%,标准品 英文名称RatcarbonicanhydraseELISAKit大鼠酶(CA)规格:96T/48T
黄独素B Diosbulbin B 质量规格:HPLC≥98%,标准品 化妆品阿斯巴塘(aspaame)含量薄层色谱法定性检测试剂盒20
黄连碱 Coptisine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 ELISAKitVEGF-B人血管内皮细胞生长因子B规格:48T/96T
黄芪皂苷I Astragaloside I 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠含TCP1伴侣蛋白亚基2(CCT2)elisa ,英文名: CCT2 ELISA Kit
黄芪皂苷II Astragaloside II 质量规格:HPLC≥98%,标准品 人脱氧尿三0酸(DP)ELISA检测试剂盒Humandeoxyuridineiphate,DPELISAKit 96T/48T
黄芪皂苷III Astragaloside III 质量规格:HPLC≥98%,标准品 大鼠同型半胱(Hcy)试剂盒 Rat Homocysteic acid,Hcy ELISA Kit
黄芪总皂苷 Astragaloside 质量规格:UV≥98%,标准品 英文名称RatcarbonicanhydraseELISAKit大鼠酶(CA)规格:96T/48T
黄杞苷 Engeletin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 化妆品阿斯巴塘(aspaame)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒20
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。 8、结果分析
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。