胞质蛋白提取试剂盒
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胞质蛋白提取试剂盒

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2022-06-22 16:54:17
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编号 :BJ-F0165219;
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BJ-F0165219
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上海邦景实业有限公司

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产品简介

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详细介绍

中文名称:胞质蛋白提取试剂盒
英文名称:Cytoplasmic Protein Extraction Kit
产品规格:50T|100T
发货周期:13
产品货号:BJ-F0165219

产品介绍:

本试剂盒提供全套试剂,适用于从细胞和动物组织制备胞浆蛋白。提取过程简单方便,可在1小时内完成。制备的胞浆蛋白不仅纯度高,保持天然活性,而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western   Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

储存条件:-20℃保存。

有效期:一年。

使用方法:本产品仅用于科研
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一级容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由专人(2)运送,不得邮寄,最好使用专车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在-70以下保存。无-70条件的,需在4冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20-40时不稳定,故长期保存最好在-70温度以下进行。

注意事项:
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物AB液时,避免使用带金属部分的加样器。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

操作规程
1
、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升500010000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2
.加入适当浓度的010μL 受试化合物。
3
、将96孔板在37,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4
、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5
、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6
、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7
、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8
、结果分析
 a
、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD×100
 b
、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

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