单增李斯特氏菌验证培养基

（ L. mono Confirmatory HiVeg™ Agar Base）

应用

*用于从临床样本和食品样本中选择鉴别性分离单核细胞增生李斯特菌。

原理和说明
单增李斯特氏菌验证培养基采用了无疯牛病/传染性海绵脑病风险的植物源特别蛋白胨，用于取代动物源的特别蛋白胨。单核细胞增生李斯特氏菌是一种革兰氏阳性食物致病菌。它可造成孕妇严重感染，终导致流产、死胎、新生儿李斯特氏菌病和脑膜炎，或成人和青少年原发性菌血症。

单核细胞增生李斯特氏菌同其他李斯特氏菌种的鉴别，是依据磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C（PIPLC）活性（1,2）和α-甲基-D-甘露糖苷的发酵。磷脂酶C是一种重要的毒力因子，只有单核细胞增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌具有。单核细胞增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌水解培养基中的底物（FD227），菌落周围产生不透明的光晕。单核细胞增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌之间的鉴别是通过观察α-甲基-D-甘露糖苷的发酵。单核细胞增生李斯特氏菌发酵α-甲基-D-甘露糖苷，在菌落周围产生黄色光晕。伊氏李斯特氏菌不发酵α-甲基-D-甘露糖苷，菌落周围也没有黄色光晕。

培养基中的特殊蛋白胨、胰蛋白胨和大豆蛋白胨提供含氮物质、*复合物和其他必需的营养成分。鼠李糖为发酵糖，酚红为指示剂。氯化钠维持渗透压平衡。氯化锂和添加剂1（FD181）抑制大多数革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、酵母菌和霉菌生长。磷脂酶C水解添加剂2（FD214），通过在单增李斯特菌菌落周围产生不透明的光环，用以证明PIPLC活性的存在。

培养基组分

　成分　　　　　　　克/升

HiVeg特别蛋白胨     30.00

酵母膏              6.00

氯化钠              5.00

氯化锂              10.00

无水*      2.50

B.C.指示剂          8.60

α-甲基-D-甘露糖苷  3.00

琼脂                12.00

终pH（25）        7.2±0.2

配置
称量38.50g干粉溶于 470ml蒸馏水。加热使全溶。15磅（121℃）灭菌15分钟。冷却至45-50℃。无菌添加复溶的选择性添加剂1（货号FD212）和添加剂2（货号FD213）各1管、增菌添加剂II(货号FD227)1管。混匀并倾注无菌平皿中。

警告：氯化锂是有害的。避免身体接触和吸入蒸气。一旦与皮肤接触，应用大量水冲洗。

质量控制
外观：粉棕色均一自由流动粉末。

成胶性：牢固，与1.2％琼脂凝胶相当。

成品颜色和透明度：紫色的不透明凝胶。

配比浓度：25℃时，7.7%水溶液（7.7g干粉/100ml蒸馏水）pH值为7.20±0.2

培养反应

加入3种添加剂后35-37℃孵育24-48小时，观察培养菌落特征

1. 单核细胞增生李斯特氏菌

2. 伊氏李斯特菌

3. 英诺克李斯特菌

4. 斯氏李斯特氏菌

参考文献
1. Ottaviani F., Ottaviani M., and Agosti M. (1997 a), Industrie Alimentari 36, 1-3.

2. Ottaviani F., Ottaviani M., and Agosti M. (1997 b), Quimper Froid Symposium Proceedings p.6, A.D.R.I.A. Quimper, France, 16-18 June 1997.