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ProteoStat® Aggresome detection kit ProteoSta
面议MagCapture™ 外泌体提取试剂盒
面议DENARASE®全能核酸酶
¥1000Cationic bovine Serum Albumin (cBSA)
¥1560CCK试剂盒 Cell Counting Kit
¥1030Chromomycin A3 色霉素A3
¥3080NEWZERUM优级胎牛血清
¥2100NEWZERUM特级胎牛血清
¥4800DSS葡聚糖硫酸钠盐
¥3680Zeocin bolaimeisu
¥2860Brefeldin A 布雷非德菌素A
¥450Agar,BactoTM 细菌琼脂
¥1180丙二醛(MDA)是脂质过氧化作用的天然副产物,被广泛用作确定氧化应激和自由基形成的关键指标。MDA的测量在历*一直依赖于与硫代*酸(TBA)的反应,以产生可以比色法或比色法测量的化合物。但是该测定法并非特定于MDA,而且还可以在90-100°C的酸性条件下进行。已经有许多商业化的ELISA试剂盒,这使其更加昂贵和乏味。Amplite™比色丙二醛(MDA)定量试剂盒提供了快速,方便的方法来测量MDA,而无需使用TBARS加热步骤。MDA Blue™与MDA反应生成蓝色产物,该产物用酶标仪在695 nm下测量。
吸光度酶标仪 | |
吸光度 | 695纳米 |
推荐板 | 清除底部 |
成分A:MDA Blue™ | 1个小瓶 |
组分B:稀释缓冲液 | 1瓶(10毫升) |
组件C:MDA标准 | 1小瓶(冻干粉) |
组分D:反应溶液 | 1瓶(10毫升) |
准备测试样品以及系列稀释的MDA标准品(50 µL)
添加MDA Blue™储备溶液(10 µL)
在室温下孵育10-30分钟
添加反应溶液(40 µL)
在室温下孵育30-60分钟
监测OD在695 nm处的增加
重要说明
开始实验前,请在室温下解冻所有组分。
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。
1. MDA标准溶液(100 mM):
将100 µL ddH 2 O加入MDA标准样品瓶(组分C)中,制成100 mM MDA储备溶液。
为了方便起见,请使用我们的系列稀释计
向996 µL稀释缓冲液(组分B)中加入4 µL 100 mM MDA标准液,得到400 µM MDA溶液(MDA7)。然后在稀释缓冲液中进行1:2的系列稀释,以得到系列稀释的MDA标准品(MDA6-MDA1)。
表1. MDA标准品和测试样品在96孔透明底部微孔板中的布局。MDA = MDA标准品(MDA1-MDA7,6.25至400 µM),BL =空白对照,TS =测试样品。
BL | BL | TS | TS |
MDA1 | MDA1 | ... | ... |
MDA2 | MDA2 | ... | ... |
MDA3 | MDA3 | ||
MDA4 | MDA4 | ||
MDA5 | MDA5 | ||
MDA6 | MDA6 | ||
MDA7 | MDA7 |
表2.每个孔的试剂组成。
好 | 体积 | 试剂 |
MDA1-MDA7 | 50微升 | 连续稀释(6.25至400 µM) |
BL | 50微升 | 稀释缓冲液(组分B) |
TS | 50微升 | 测试样本 |
根据表1和2中提供的布局,准备MDA标准品(MDA),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 µL试剂,而不是50 µL。
在MDA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入10 µL MDA Blue™(组分A)溶液。对于384孔板,在每个孔中使用5 µL MDA Blue™溶液。
将反应混合物在室温下孵育10-30分钟。
加入40 µL反应溶液(组分D)使总测定体积为100 µL /孔。对于384孔板,请使用20 µL反应溶液,总测定体积为50 µL /孔。
将zui终反应混合物在室温下孵育30-60分钟。
使用吸光度板读数器监控吸光度,并在695〜700 nm的OD下进行路径检查校正。
2.82.11.40.7400200- Formaldehyde- Glyceraldehyde- MDAData legendGenerated with Quest Graph™Aldehyde Concentration (uM)AbsHover mouse to interact
从空白标准孔获得的读数(Abs)用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值即可得到基线校正值。然后,绘制标准读数,以获得标准曲线和方程式。该方程式可用于计算醛浓度样品。我们建议您使用在线线性回归计算器
10070 | Amplite™比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒 | Amplite™ Colorimetric Malondialdehyde (MDA) Quantitation Kit |
10071 | Amplite™荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒 | Amplite™ Fluorimetric Malondialdehyde (MDA) Quantitation Kit |
10085 | Amplite™比色法α-酮戊二酸定量试剂盒 | Amplite™ Colorimetric α-Ketoglutarate Quantitation Kit |
10087 | Amplite™荧光法α-酮戊二酸定量试剂盒 | Amplite™ Fluorimetric α-Ketoglutarate Quantitation Kit |
11000 | Amplite™ADHP过氧化物和过氧化酶荧光探针*相当于Amplex Red* | Amplite™ ADHP [10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine] *CAS#: 119171-73-2* |