沃博生物代理的NEWZERUM新西兰品牌血清品牌具有百年历史，血源来源新西兰和澳大利亚具有出口资质的屠宰场，zui大单批次量可达 2000L,确保同一批次质量同时提供充足的血清供应七次无菌过滤，zui后三次为0.1 µm无菌过滤处理，进行细菌、真菌、支原体、病毒及病毒抗体检测，符合动物协会要求。

产品详情

描述：
      内毒素含量极低<5EU/ml(规定：特级胎牛血清<10 EU/ml)
      极利于细胞的生长和传代 ，适合各种细胞培养
      每个批号血清均具有完整的检验报告
      七次无菌过滤，zui后三次为0.1 µm无菌过滤处理
      进行细菌、真菌、支原体、病毒及病毒抗体检测，符合动物协会要求
      每个批号血清库存量达500-1000升，保证供应充足
特点：
      极低内毒素，支持各类难养细胞;
      同批号跟踪发货，确保实验数据连续稳定;
      海外厂家直供，市场价格透明;
      十年诚恳信誉，温暖售后保证!
建议使用范围：
     科研使用; 细胞培养

推荐血清融化方法：

注意：
♦ 在水浴过程中，血清的平面要*浸在水中。在融化过程中要慢慢摇动，使血清混匀，但不要产生泡沫!
♦胎牛血清不推荐热灭活。
储存：
      -20°C冻存，4°C保存不超过1个月。反复冻融会破坏血清中有效成分，影响血清品质。

相关产品

细胞系的培养与传代

简介（INTRODUCTION）

细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，须进行传代再培养。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。

材料（MATERIALS）

o  试剂（REAGENTS）

*培养基（RPML1640或DMEM），消化液,1XPBS

o  试剂准备（REAGENT SETUP）

1XPBS:NaCl 8g，KCl 0.2g，Na2HPO4•12H2O 3.63g，KH2PO4 0.24g，溶于900ml；双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L,高温灭菌后4℃保存,也可配制10XPBS室温保存；

*培养基：90%液体培养基+10%小牛血清（特殊需要会标注在培养基说明书上）；

yi蛋白酶消化液：0.25g的yi蛋白酶和0.02g的EDTA加入1XPBS，终体积为100ml，pH7.4，0.22um滤过除菌分装，4℃保存。

o  器械（EQUIPMENT）

EP管、15ml离心管、离心机、细胞培养箱

实验步骤（PROCEDURE）

贴壁细胞传代与培养 ►预期时间消耗：30min

1.  倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否需要传代，并将培养基与PBS置于37℃水浴，

yi酶消化液室温放置，点燃酒精灯，将所需试剂摆放到相应位置；

2．用1ml枪头弃去培养皿中上清液，加入3ml 1XPBS洗涤两遍，加入yi酶消化液1ml，轻轻摇晃后放于细胞培养箱中1min（可酌情增加时长），可以放在倒置显微镜下观察，当细胞收回突起变圆即可；

3．加入6ml培养基并吹打培养皿底，将细胞移入离心管中，1000rpm 3min离心；

4．弃上清，加入1ml培养基吹打均匀，用细胞计数板计数后取需要的细胞数量加入到新的培养基中，摇晃均匀；

5．放置培养箱中培养，可以每天观察，期间如果细胞培养基营养不够可更换成新鲜培养基。

▲关键步骤：控制好消化时间，有些贴壁细胞贴壁较紧，需要确保吹打均匀。

悬浮细胞传代与培养 ►预期时间消耗：30min

1．倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否需要传代，并将培养基与PBS置于37℃水浴，yi酶消化液室温放置

2．点燃酒精灯，将所需试剂摆放到相应位置

3．将培养皿中培养基移入15ml离心管中，800rpm离心5min

4．弃上清，用2ml 1XPBS洗涤两次，每次800rpm离心5min

5．加入1ml*培养基，细胞计数后取需要的细胞数量加入到新的培养基中，摇晃均匀

▲关键步骤：吹打细胞需要轻柔，并且混合均匀。

针对性建议（TROUBLESHOOTING）

细胞培养条件会根据不同细胞要求不同，以下是总结的条件：

1. 293：人肾上皮细胞， 10%FBS DMEM，从培养皿板底吹下传代；

2. BHK‐21：幼地鼠肾细胞， 10%FBS DMEM，yi酶消化传代；

3. NK92：人的 NK 细胞系（悬浮细胞系）， 12.5%FBS +12.5%horseserum α‐mem， 100U/ml 的 IL‐2；

4. MCF‐7：人乳腺癌细胞， 10%FBS DMEM， PBS 冲洗两次yi酶消化传代；

5. L929： 1:3 传代，扩大培养去上清。长满后取走上清，换新鲜培养基，过 2,3 天可以取用，一共可以取两批；

6. HT‐29：结肠癌细胞。 10%FBS DMEM， PBS 冲洗两次yi酶消化传代；

7. 293T： 10%FBS DMEM，从培养皿板底吹下传代；

8. DC2.4： 10%FBS DMEM，yi酶消化传代；

9. Hela: 人宫jing癌细胞。 10%FBS DMEM， PBS 冲洗两次yi酶消化传代。 2ml 长三天满；

10. Thp1: 10%FBS 1640 培养， 3 天一代，细胞长过影响状态，小瓶留 2ml 传代，大瓶留 7ml 传代；

11. HepG2:人肝癌细胞系。 10%FBS DMEM， PBS 冲洗两次yi酶消化传代；

12. LO2: 正常 10%FBS DMEM， PBS 冲洗两次yi酶消化传代；

13. Huh 7: 人肝癌细胞系。 10%FBS DMEM， PBS 冲洗两次yi酶消化传代；

14. Hepa1‐6(mice liver cancer cells): 10%FBS DMEM， PBS 冲洗两次yi酶消化传代；

15. NCTC 1149(mice liver cells): 10% horse serum DMEM， PBS 冲洗。