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FITC-Phalloidin FITC-鬼笔环肽
¥2004.6ER-Tracker Blue-White DPX, for live-cell imaging
¥648ER-Tracker Green (BODIPY® FL Glibenclamide),
¥1680ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide), fo
¥1680Golgi-Tracker Green (BODIPY® FL C5-Ceramide )
¥1680NBD C6-Ceramide for Golgi Staining
¥1680MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator
¥700Hypoxyprobe Gemini Kit - Dual marker; non-crossrea
¥9520Cell Meter™荧光细胞脂质过氧化测定试剂盒
¥3540Cell Meter™细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒
¥4740Cell Meter™荧光法细胞周期检测试剂盒
¥2340Amplite™ 比色法β-内酰胺酶活性检测
¥4740膜性肾病(MN)是人类肾病综合征常见的病因之一。膜性肾病以肾炎和肾功能衰竭为特征,包括肾小球基底膜(GBM)免疫复合物聚集引起的蛋白尿。 Chen,etal.等研究用阳离子牛血清白蛋白(cBSA)免疫小鼠,通过小鼠肾脏沉积cBSA-IgG免疫复合物诱导膜性肾病,这种肾病称为免疫复合物肾小球肾炎(IGGN)。
Chondrex公司提供阳离子牛血清白蛋白(cBSA)和*弗氏佐剂用于诱导小鼠免疫复合物肾小球肾炎(IGGN)。同时提供小鼠白蛋白检测试剂盒用于评估
免疫复合物肾小球肾炎发展进程。具体造模流程参照“小鼠免疫复合物肾小球肾炎造模方案”。
Chonrex提供以以下试剂用于免疫复合物肾小球肾炎模型制备和评估。
货号 | 中文名称 | 英文名称 | 规格 |
9058 | 阳离子牛血清白蛋白 | Cationic Bovine Serum Albumin (cBSA) | 20mg |
7008 | *弗氏佐剂 | Complete Freund's Adjuvant,1mg/ml | 5ml |
3012 | 小鼠白蛋白检测试剂盒 | Mouse Albumin Detection Kit | 1Kit |
小鼠免疫复合物肾小球肾炎(IGGN)造模流程
免疫复合物肾小球肾炎(IGGN)模型可以通过诱导Balb/c或ICR小鼠,但是C57BL/6小鼠不能诱导产生该模型。
操作流程:
1. CBSA 和弗氏*佐剂制备乳剂,尾根部免疫100ug.
2.等待2周。
3.每隔一天静脉注射400ug cBSA(一共免疫5次)
4.收集16个小时内小鼠尿样
5.测定尿样中的尿蛋白
注:Balb/c可能会发生过敏性休克。这种情况,第14天免疫50ug cBSA就可以,16-22天继续免疫400ug。
图1.用Balb/c小鼠诱导ICGN模型
2. ICGN模型病程监测
为了监测ICGN模型的严重性,Chondrex 公司推出了小鼠尿蛋白检测试剂盒(cat#3012)。小鼠肾脏会渗漏血清成分如danhong素,导致用比浊法测定的尿蛋白水平偏高,因此尿蛋白并非评估肾炎严重程度的适宜标志物。而当肾脏功能开始发生异常时,白蛋白是尿液中先出现的蛋白,因此,白蛋白是评估小鼠肾炎模型的更适宜标志物。对于小鼠IGGN肾炎模型,如果一个采集了16小时尿液的样本中总白蛋白量多于1mg,就可以认为该小鼠患有肾炎。
值得注意的是,16小时尿液的样本中,尿白蛋白水平可以达到50-200 mg,这种情况被认为是严重肾炎。
3. 小鼠ICGN模型致病原理
人的膜性肾病是由免疫复合物沿着基底膜与内皮细胞之间的间隙沉积而引起的。沉积的免疫复合物激活补体,导致基底膜变厚。对于小鼠ICGN模型,用cBSA反复免疫小鼠。带正电荷的cBSA与带负电荷的基底膜(GBM)结合。抗cBSA抗体(主要是IgG1)与cBSA产生的免疫复合物,导致人膜性肾病出现多种症状,如:基底膜增厚,低蛋白血症和蛋白尿。这种发病机制,同样适用在儿童膜性肾病。
4. 免疫复合物肾小球肾炎(IGGN)背景介绍
肾小球肾炎是指一系列由免疫应答介导的导致肾小球炎症。膜性肾病和膜性肾小球肾炎是人类肾病综合征常见的病因。膜性肾病的特征是由免疫复合物沿着基底膜与内皮细胞之间的间隙沉积,导致基底膜增厚激活补体。激活的炎症级联导致肾功能受损,包括蛋白尿和肾功能衰竭。
有研究报道用大鼠膜性肾病模型(Heymann肾炎),研究人膜性肾病,尽管Heymann肾炎覆盖了人膜性肾炎的很多方面,但是使用大鼠作模型有很多缺点。小鼠膜性肾炎模型是研究膜性肾病发病机制和开发靶向治疗的重要研究工具。Wayne et al.等研究用cBSA可诱导兔膜性肾病症状。另外,已有研究用cBSA在狗、猫、兔等动物成功诱导免疫复合物肾小球肾炎模型。Chen et al,将这一模型用于小鼠,称为:免疫复合物肾小球肾炎(IGGN)模型。
参考文献:
1.Chen, J.S., et al., Mouse model of membranous nephropathy induced by cationic bovine serum albumin: antigen dose response relations and strain differences. Nephrol Dial Transplant 19(11):2721-8 (2004).
2.H. Debiec et al., Early-childhood membranous nephropathy due to cationic bovine serum albumin. N Engl J Med. 364, 2101–2110 (2011).
3.Yamamoto, T., et al., Bovine serum albumin (BSA) nephritis in rats. I. Experimental model. Acta Pathol Jpn 28(6): p. 859-66 (1978).
4.Bass, P.S., et al., The effect of cyclosporin A on cationized bovine serum albumin-induced nephropathy in NZW rabbits. J Pathol 167(1):41-7 (1992).
5.Wright, N.G., et al., Experimental immune complex glomerulonephritis in dogs receiving cationized bovine serum albumin. Res Vet Sci 38(3):322-8 (1985).
6.Nash, A.S., N.A. Mohammed, and N.G. Wright, Experimental immune complex glomerulonephritis and the nephrotic syndrome in cats immunised with cationised bovine serum albumin. Res Vet Sci 49(3):370-2 (1990).