汞离子是*的金属离子，在许多生物过程中都起着重要作用。汞离子被认为是zui危险的污染物和高度危险的材料之一。Hg2 +的高毒性是由于它与生物配体（例如蛋白质，DNA和酶）中的巯基具有高度亲和力。当Hg2 +从环境中吸收到人体后，可能会引起微管，离子通道和线粒体中的畸变，并严重损害肾脏，心脏，大脑，胃，肠，中枢神经系统和免疫系统。另外，汞通过食物链或生态系统中的大气累积，并且由于其非生物降解性而具有相对较长的大气停留时间。由于各种原因，已经进行了深入研究，特别是，其环境影响和生物并发症。但是，为快速检测汞离子而开发的商业产品很少。汞的高度选择性和灵敏检测具有毒理学和环境重要性。Amplite™荧光汞离子定量试剂盒提供了一种基于荧光的强大分析方法，可以高选择性地测量汞离子（Hg2 +）。Mercury Lite™590本身几乎不发荧光，但结合Hg2 +离子后会产生500倍以上的荧光增强。荧光信号可以用荧光酶标仪测量。使用该试剂盒，我们能够在100 µL反应体积中检测出低至8 µM Hg2 +。为快速检测汞离子而开发的商业产品很少。汞的高度选择性和灵敏检测具有毒理学和环境重要性。Amplite™荧光汞离子定量试剂盒提供了一种基于荧光的强大分析方法，可以高选择性地测量汞离子（Hg2 +）。Mercury Lite™590本身几乎不发荧光，但结合Hg2 +离子后会产生500倍以上的荧光增强。荧光信号可以用荧光酶标仪测量。使用该试剂盒，我们能够在100 µL反应体积中检测出低至8 µM Hg2 +。为快速检测汞离子而开发的商业产品很少。汞的高度选择性和灵敏检测具有毒理学和环境重要性。Amplite™荧光汞离子定量试剂盒提供了一种基于荧光的强大分析方法，可以高选择性地测量汞离子（Hg2 +）。Mercury Lite™590本身几乎不发荧光，但结合Hg2 +离子后会产生500倍以上的荧光增强。荧光信号可以用荧光酶标仪测量。使用该试剂盒，我们能够在100 µL反应体积中检测出低至8 µM Hg2 +。Amplite™荧光汞离子定量试剂盒提供了一种基于荧光的强大分析方法，可以高选择性地测量汞离子（Hg2 +）。Mercury Lite™590本身几乎不发荧光，但结合Hg2 +离子后会产生500倍以上的荧光增强。荧光信号可以用荧光酶标仪测量。使用该试剂盒，我们能够在100 µL反应体积中检测出低至8 µM Hg2 +。Amplite™荧光汞离子定量试剂盒提供了一种基于荧光的强大分析方法，可以高选择性地测量汞离子（Hg2 +）。Mercury Lite™590本身几乎不发荧光，但结合Hg2 +离子后会产生500倍以上的荧光增强。荧光信号可以用荧光酶标仪测量。使用该试剂盒，我们能够在100 µL反应体积中检测出低至8 µM Hg2 +。

平台

组件

1. 准备汞（II）标准品或测试样品（50 µL）

2. 添加汞工作溶液（50 µL）

3. 在室温下孵育20-30分钟

4. 监测Ex / Em = 540/590 nm的荧光强度

重要说明
为了获得*效果，强烈建议使用黑色印版。开始实验前，请在室温下解冻试剂盒的组件。

储备溶液的制备

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。

1. Mercury Lite™590储液（200X）：
将25 µL DMSO加入小瓶Mercury Lite™590（组分A）中并充分混合。远离光线。注意：一次性使用等分试样，并将未使用的200X Mercury Lite™590储备溶液存储在-20ºC下，避免光照并重复冻融循环。

2.汞（II）标准储备溶液（未提供）：
我们使用汞（II）高氯酸盐水合物（Sigma 529656，CAS＃304656-34-6）作为汞（II）标准。在ddH ₂ O中以1 mM的浓度制备汞（II）的储备溶液。

配制标准溶液

为了方便起见，请使用我们的系列稀释计

使用ddH ₂ O 进行1：2系列稀释，以得到大约500、250、125、62.5、31.3、15.6和7.8 µM系列稀释的汞（II）标准品（M7-M1）。

准备工作溶液

将25 µL Mercury Lite™590储备溶液加入5 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合（组分A + B）。 注意：这种汞工作液足以用于一个96孔板。它不稳定，请及时使用。

程序

表1.  黑色96孔微孔板中汞（II）标准品和测试样品的布局。M =汞（II）标准品（M1-M7，7.8至500 µM），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.  每个孔的试剂组成。

1. 根据表1和表2提供的布局，准备并添加汞（II）标准（M），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，请每孔使用25 µL试剂代替50 µL。
   

2. 将50 µL汞工作溶液添加到汞（II）标准液，空白对照和测试样品的每个孔中，使总汞测定体积为100 µL /孔。对于384孔板，向每个孔中添加25 µL的汞工作溶液，总体积为50 µL /孔。
   

3. 在避光的条件下，将反应在室温下孵育20-30分钟。
   

4. 使用荧光板读数器在Ex / Em = 540/590 nm，截止570 nm处监视荧光的增加。

数据分析

100010010110010- Dose-ResponseData legendGenerated with Quest GraphMercury II (uM)RFUHover mouse to interact

从空白标准孔获得的读数（RFU）用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值即可得到基线校正值。然后，绘制标准读数，以获得标准曲线和方程式。该方程式可用于计算水银II样品。