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ProteoStat® Aggresome detection kit ProteoSta
面议MagCapture™ 外泌体提取试剂盒
面议DENARASE®全能核酸酶
¥1000Cationic bovine Serum Albumin (cBSA)
¥1560CCK试剂盒 Cell Counting Kit
¥1030Chromomycin A3 色霉素A3
¥3080NEWZERUM优级胎牛血清
¥2100NEWZERUM特级胎牛血清
¥4800DSS葡聚糖硫酸钠盐
¥3680Zeocin bolaimeisu
¥2860Brefeldin A 布雷非德菌素A
¥450Agar,BactoTM 细菌琼脂
¥1180钾(K +)离子通道在调节基本生物过程(包括心率,激素和神经递质分泌,水和电解质平衡)中起重要作用。钾离子通道已被认为是包括心律不齐,疼痛,糖尿病,神经功能障碍等在内的疾病适应症的药物靶标。Tl +通过K +通道的渗透性已被广泛用于测定K +通道。表达感兴趣的K +通道的细胞(例如hERG,Kv1.3,Kir2.1,KATP)预先装有Tl +敏感染料。该染料是非荧光的,并且对细胞膜是可渗透的。进入细胞内部后,非荧光AM酯染料会被内源性酯酶裂解为带负电荷的染料,并留在细胞内部。当将含有低剂量Tl +的刺激缓冲液添加到细胞中时,Tl +流过K +通道并与Tl +敏感染料结合,产生荧光信号。该信号与K +通道的活动成正比。如果将拮抗剂或拮抗剂添加至细胞,则荧光信号分别降低或升高,以反映K +通道的抑制或刺激活性。
荧光酶标仪 | |
激发 | 490纳米 |
发射 | 525纳米 |
隔断 | 515纳米 |
推荐板 | 黑墙/透明底 |
仪器规格 | 底部读取模式/可编程液体处 |
其他仪器 | |
FDSS,FLIPR,ViewLux,NOVOStar,ArrayScan,FlexStation,IN细胞分析仪 |
组件A:Tl-520 AM | 1个小瓶 |
组分B:10倍Pluronic®F127 Plus | 1瓶(1毫升) |
成分C:HHBS(具有20 mM Hepes的汉克斯) | 1瓶(9毫升) |
组分D:5X无氯测定缓冲液 | 1瓶(2毫升) |
成分E:K2SO4(250毫米) | 1瓶(2毫升) |
成分F:Tl2SO4 | 未提供(Sigma Cat#:208191) |
在生长培养基中准备细胞
添加Tl-520 AM染料加载溶液(对于96孔板为100 µL /孔,对于384孔板为25 µL /孔)
在37°C孵育1小时
加入激动剂/拮抗剂并在37°C下孵育30分钟
添加Tl 2 SO 4 / K 2 SO 4 刺激溶液(96孔板为50 µL /孔,384孔板为12.5 µL /孔)
监测Ex / Em = 490/525 nm的荧光强度
重要说明
请勿添加其他binguangshu。使用前,请在室温下解冻所有套件组件。
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。
1. TI-520 AM储备溶液:
将20 µL(目录号36550)或200 µL(目录号36551和#365552)的DMSO加入到TI-520 AM(组分A)的小瓶中,并充分混合。注意:未使用的TI-520 AM储备溶液可以等分并保存在 < -20 o C下。避光,并避免重复的冻融循环。
2.测定缓冲液(1×):
添加1个10X毫升的Pluronic ® F127加(成分B)到9ml HHBS缓冲液(成分C)的并充分混合。注意:10 mL 1X分析缓冲液足以用于一块板。分装和储存未使用10X的Pluronic ® F127加(成分B),在 < -20 ö C.避光和避免反复冻融。
3.无氯缓冲液(1X):
在8 mL ddH 2 O中加入2 mL无氯缓冲液(5X)(组分D),并充分混合。
4. Tl 2 SO 4溶液(未提供,Sigma Cat#208191):将
Tl 2 SO 4溶解在超纯水中至终浓度为80 mM。注意:Tl 2 SO 4有毒。采取必要的预防措施,以防止吸入和皮肤接触。
1. TI-520 AM染料加载溶液:
将20 µL TI-520 AM储备溶液(500X)加入10 mL的1X分析缓冲液中并充分混合。
2.刺激溶液(5X):
在1X无氯化物缓冲液中用Tl 2 SO4 稀释配体(用于非电压门控钾通道)或K 2 SO4(用于电压门控钾通道)。
表1. 参考(用于HEK293-KCNH 2电池中的电压门控hERG通道),Tl 2 SO 4和K 2 SO 4(用于电压门控钾通道)或配体(用于非电压门控钾通道)的浓度应针对每个靶通道和细胞类型优化化验。
36551 | Screen Quest™免洗钾离子通道检测试剂盒 | Screen Quest™ No Wash Potassium Channel Assay Kit | 10 Plates |
36552 | Screen Quest™免洗钾离子通道检测试剂盒 | Screen Quest™ No Wash Potassium Channel Assay Kit | 100 Plates |
36700 | PG-cholesterylamine | PG-cholesterylamine | 1 mg |
36701 | 胆酸示踪探针CLF 在肝细胞或组织中的标记和示踪 | CLF [Cholyl-Lys-Fluorescein] | 1 mg |
36702 | 葡萄糖转运/血糖通道荧光探针2-NBDG | 2-NBDG [2-(N-(7-Nitrobenz-2-oxa-1,3-diazol-4-yl)Amino)-2-Deoxyglucose] *CAS#: 186689-07-6* | 5 mg |