TWO-PRO™-1在化学上等同于TO-PRO®-1（TO-PRO®是Invitrogen的商标）。TWO-PRO™-1是一种碳花青二聚体，具有类似于FITC的绿色荧光。它不具有细胞渗透性，可以很容易地与Cy5和若丹明区别开来，作为核复染和死细胞指示剂。在不存在核酸的情况下它是非荧光的，并且在与DNA结合后会产生非常明亮的荧光信号。TWO-PRO™-1可在培养细胞和石蜡切片中进行强而有选择性的核染色。同时使用细胞可渗透的Nuclear Red™LCS1染料和不渗透细胞的TWO-PRO™-1进行标记，可用于评估细胞活力。TWO-PRO™-1和Nuclear Red™的消光系数都比结合DNA的dain化丙啶大。

准备工作解决方案

TWO-PRO™-1工作解决方案

用20 mM Hepes缓冲液（HH缓冲液）或所需浓度的任意缓冲液在Hanks中制成TWO-PRO™-1工作溶液。
注意      在初始实验中，*尝试几种染料浓度，以确定产生所需结果的*浓度。高染料浓度倾向于引起其他细胞结构的非特异性染色。

样品实验方案

注意：以下协议可适用于大多数细胞类型。生长培养基，细胞密度，其他细胞类型和因素的存在可能会影响染色。玻璃器皿上残留的洗涤剂也可能会影响许多生物的染色，并导致溶液中存在或不存在细胞的情况下，染上鲜艳的物质。

1. 根据需要生长和处理细胞。
2. 除去细胞培养基并固定细胞。
3. 向细胞（悬浮细胞或贴壁细胞）中加入TWO-PRO™-1工作溶液（1至10 µM），并对细胞染色15至60分钟。
4. 除去染料工作溶液并添加HH缓冲液或您选择的缓冲液。
5. 使用FITC滤光片，用荧光显微镜分析细胞染色。 

   17571	TWO-PRO™ 1 (相当于TO-PRO® 1)死细胞核染料	TWO-PRO™ 1  (equivalent to TO-PRO® 1) *5 mM DMSO Solution* *CAS 157199-59-2*	0.2 ml
   17572	TWO-PRO™ 3 (相当于TO-PRO® 3)死细胞核染料	TWO-PRO™ 3 (equivalent to TO-PRO® 3) *5 mM DMSO Solution* *CAS 157199-63-8*	0.2 ml
   17575	DiTO™-1 *1 mM DMSO溶液* (相当于TOTO®-1) 死细胞核染料	DiTO™-1 (equivalent to TOTO®-1) *5 mM DMSO Solution* *CAS 143413-84-7*	0.2 ml