酯酶催化的太阳红醋酸盐（SRA）水解产生太阳红荧光团，可以用633 nm激光激发，发射出约660 nm的荧光。使用大多数商业荧光仪器通常配备的Cy5滤光片套件，可以轻松检测到Sun Red的荧光。尽管太阳红很容易在633 nm处激发，发出约660 nm的红色光，但SRA在633 nm处具有极小的吸收而无红色发射，这使SRA成为敏感的NIR酯酶底物之一。SRA为细胞活力测定提供了第二种颜色，而流行的荧光素颜色可以用于另一种细胞功能测定。SRA是一种非荧光疏水化合物，可以穿过细胞膜，随后细胞内酯酶水解乙酸酯基团，产生高荧光产物Sun Red。太阳红分子在具有完整膜的细胞中积累，因此深红色荧光可以用作细胞活力的标志。不具有完整细胞膜或活跃代谢的细胞可能不会积聚荧光产物，因此不会显示深红色荧光。SRA可以与绿色活体染色剂（例如FITC或Alexa Fluor 488标记的抗体）结合使用。

1. 用测试化合物准备细胞
2. 取出介质
3. 添加SunRed™醋酸盐工作溶液（100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板）
4. 在5％CO ₂培养箱中于37°C 孵育1小时
5. 用HHBS清洗并更换工作溶液
6. 在Ex / Em = 620/660 nm处读取荧光强度（截止640 nm）

重要说明
以下是推荐的协议。它仅提供一个准则，应根据具体需要进行修改。

储备溶液的制备

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，制备后应储存在-20°C下。避免重复冻融循环。

1. SunRed™醋酸盐原液（2至10 mM）
准备2至10 mM的SunRed™醋酸盐在DMSO中的原液。储备溶液应及时使用。

SunRed™醋酸盐工作溶液：
在实验之前，在具有20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液的1X Hank盐溶液中准备5至10 µM的SunRed™醋酸盐工作溶液。

程序

1. 从细胞中除去培养基。
    
2. 加入100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的SunRed™醋酸盐工作溶液。
    
3. 在避光的情况下，在室温或37°C下将SunRed™醋酸盐工作溶液板孵育1小时。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。对于非贴壁细胞，建议在孵育后以800 rpm的速度离心细胞板2分钟，然后制动。
    
4. 在Ex / Em = 620/660 nm（截止640 nm）下监测荧光强度。

   11410	Amplite™ 比色法肠激酶活性检测试剂盒	Amplite™ Colorimetric Enterokinase Activity Assay Kit	200 Tests
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   11501	Amplite™荧光法过氧化氢检测试剂盒 *红色荧光*	Amplite™ Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit *Red Fluorescence*	500 Tests