HP5-100KitHypoxyprobe Gemini Kit - Dual marker; non-crossrea
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¥1180编号 | 组分名称 | 货号(规格) | 保存方法 | ||
HP5-100Kit | HP4-500Kit | HP5-1000Kit | |||
1 | pimonidazole HCl (Hypoxyprobe™-1) | 100mg | 200mg | 1000mg | 2-8℃避光 |
2 | CCI-103F (Hypoxyprobe™-F6) | 100mg | 200mg | 1000mg | 2-8℃避光 |
3 | Diluted Rabbit anti-pimonidazole antisera (PAb2627) | 200μl | 200μl | 2×200μl | 2-8℃保存 |
4 | Diluted Rabbit anti-CCI-103F antisera (PAbF6) | 200μl | 200μl | 2×200μl | 2-8℃保存 |
试剂盒组分详细描述:
一、Hypoxyprobe-1(Pimonidazole HCl)
Hypoxyprobe-1 是2-硝基咪唑的替代物,其化学名和*成分是Pimonidazole hydrochloride(Pimonidazole HCl),分子量为290.8,水溶性为400mM(=116 mg/ml),紫外吸收(324nm)的吸光系数为7020(0.9%生理盐水)。
Hypoxyprobe-1的粉末和溶液形式皆具化学稳定性。比如,固体形式的Hypoxyprobe-1于柔弱光线下室温保存2年,UV和HPLC分析法评估无任何降解发生。溶于0.9%生理盐水的Hypoxyprobe-1,浓度100g/L置于2-8℃保存4.5年,UV和HPLC分析法评估无任何降解发生。
作用机理:缺氧细胞中Pimonidazole被还原后得以活化。这一活化的中间物与蛋白质、多肽和氨基酸中的巯基基团(thiol groups)形成稳定的加合物。Mab1抗体结合这些加合物从而能借由免疫化学法来检测。
二、Hypoxyprobe™-F6 (CCI-103F)
Hypoxyprobe-F6(CCI-103F)是带有6个磁性相等氟原子的六氟-2-硝基咪唑,分子量为337.2,水溶性为5.3mM(=1.8 mg/ml)。CCI-103F通常以10% DMSO/花生油混合物的形式腹腔注射入动物体内。
CCI-103F储存于弱光下非常稳定。
作用机理:缺氧细胞中CCI-103F被还原后得以活化。这一活化的中间物与蛋白质、多肽和氨基酸中的巯基基团(thiol groups)形成稳定的加合物。一抗(Anti-CCI-103F抗血清)结合这些加合物从而能借由免疫化学法来检测。
三、Anti-Pimonidazole rabbit antiserum (PAb2627)抗体和Anti-CCI-103F rabbit antiserum (PAbF6)抗体
PAb2627和PAbF6分别特异结合还原活化后的Pimonidazole 和CCI-103F形成的蛋白加合物,以稀释的抗血清形式提供。
感兴趣组织可用免疫组化检测(IHC),冰冻切片或者福尔马林固定的石蜡包埋切片;也可组织降解后用流式分析法检测;以及WB;
对福尔马林固定、石蜡包埋的连续性组织切片进行免疫过氧化物分析,使用100μl anti-pimonidazole或anti-CCI-103F(1:500稀释)孵育。显色的山羊抗兔二抗用来显示缺氧标记加合物的分布情况。
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