2min DNA/RNA直提试剂盒
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参考价: ¥936

具体成交价以合同协议为准
2024-05-22 12:35:12
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属性:
货号:XG-P3118;规格:100T;包装:盒装;用途:仅供科研研究实验;
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规格:
100T;
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产品属性
货号
XG-P3118
规格
100T
包装
盒装
用途
仅供科研研究实验
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2min DNA/RNA直提试剂盒

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100T 936元 15 盒可售
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上海西格生物科技有限公司

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产品简介

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详细介绍

2min DNA/RNA直提试剂盒

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分类

XG-P3118

100T

核酸纯化专题

本试剂适合从各种组织、体液中快速提取制备 PCR检测级别的基因组 DNA 和 RNA。制备的 DNA 和 RNA 可直接应用于 TaqMan PCR、One-Step PCR、LAMP、RPA 的扩增实验。该试剂制备 DNA/RNA 样品操作及其简单,通常2min 内可完成制备。
储存: 室温保存 6 个月,若长期保存请置于-20℃(5 年)。
适用组织类型
从感染病毒的组织样本中提取病毒 DNA/RNA。
从感染细菌的组织样本中提取细菌 DNA。
从动物口腔唾液拭孖中提取病毒 DNA/RNA。
从植物组织中提取 DNA/RNA。
从血浆、血清中提取病毒 DNA/RNA
操作方法
1. 动物、植物组织中提取病毒 DNA/RNA将组织样本约 1~10 mg 放入到 1.5mL EP 管中,并加入500 μl 溶液 DNA/RNA DirOut-A,加入几粒钢珠,置于组织研磨仪中研磨 1min 左右。研磨完毕后加入 100 μl 的DNA/RNA DirOut-B 溶液,漩涡混合均匀(可短离心将未磨碎的组织去除),取 0.5 μl 的该溶液作为 DNA/RNA 模板,直接用于下游 PCR 等试验即可。注意:组织使用量不要超过 50mg,过多的组织量会抑制后续 PCR 反应。
2. 从血清、血浆、唾液等体液中提取病毒 DNA/RNA在 1.5mL EP 管中加入 100 μl 血清、血浆、唾液等液体样本,并加入 500 μl 溶液 DNA/RNA DirOut-A,漩涡混合30s。漩涡完毕后加入 100 μl 的 DNA/RNA DirOut-B 溶液,漩涡混合均匀,取 0.5 μl 的该溶液作为 DNA/RNA 模板,直接用于下游 PCR 等试验即可。
3. 从动物咀嚼过的沙包或拭孖中提取病毒 DNA/RNA剪切部分动物咀嚼过的沙包或拭孖放置到 1.5 ml EP 管中,并加入 500 μl 溶液 DNA/RNA DirOut-A,漩涡混合30s。漩涡完毕后加入 100 μl 的 DNA/RNA DirOut-B 溶液漩涡混合均匀,取 1 μl 的该溶液作为 DNA/RNA 模板,直接用于下游 PCR 等试验即可。


2min DNA/RNA直提试剂盒


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一、模板DNA:PCR反应需要模板DNA,如从细胞、组织、血液中提取DNA等;

二、引物:PCR反应的两个引物,分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域,引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物;

三、dNTPs:PCR反应中需要四种dNTPs,包括脱氧腺苷酸(dATP)、脱氧胸苷酸(dCTP)、脱氧鸟苷酸(dGTP)、脱氧胞嘧啶酸(dTTP),用于细胞分裂、DNA合成         等生物学过程,用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增;

四、Taq DNA聚合酶:PCR反应需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,还有一些其他种类的聚合酶如PFU、Phusion等,用于扩增DNA链;

五、PCR buffer溶液:对PCR反应具有缓冲作用,调节反应pH,硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛,可增强PCR反应特异性,从而提高反应效率;

六、酶切体系:PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤,常常需要进行酶切操作。

七、MARK:一种分子量标准,用来判别DNA片段大小的工具。

八、DNA纯化试剂盒:用于纯化PCR反应产物;


2min DNA/RNA直提试剂盒


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①Oligo dT
选择Oligo dT时,要求RNA必须有Poly A,所以真核生物的mRNA都适用。适合长链甚至全长mRNA的RT,对RNA样品的质量要求较高,不要有明显的DNA污染、RNA降解和RNA断裂。假如想探索新的mRNA进行RT反应,建议推荐使用Oligo dT引物。使用Oligo dT引物要比随机引物和特异性引物的稳定性要好。
②随机引物
适合各种RNA的RT,尤其适合模板丰度很低的情况(比如某个gene表达量很低)。选择随机引物时,第链cDNA合成反应中就是以所有的RNA为模板,然后进行PCR反应时设计引物进行特异性扩增。同时要注意随机引物的量和总RNA量之间的关系,一般建议每5µg总RNA的随机引物的用量为50ng,如果每5µg总RNA的随机引物的用量超过250ng,可能会导致小片段产物(<500bp)的增加和长片段、全长产物的降低。
③特异性引物
基因特异性引物(GSP)是某个基因序列的一部分,与模板互补的引物。该引物需要结合目标RNA的已知序列进行设计。由于引物和RNA序列特异性结合,每个目标RNA都需要一套新的基因特异性引物。因此,当分析多种目标时,则需要适用更多的RNA样本。而且不同引物退火温度本来就不相同,所以一般不推荐使用。如需要使用特异性引物,建议对退火温度进行优化。

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