平板涂布玻璃珠（无菌）

保存条件：室温干燥保存
产品介绍：
平板涂布玻璃珠提供了一种高效快速的菌液（大肠杆菌、酵母菌液等）涂布方法。平板涂布玻璃珠（直径4 mm）光滑均匀，无菌包装，表面经特殊工艺处理，不残留菌液。与传统方法比较，使用平板涂布玻璃珠，菌液涂布更加均匀，并能够覆盖传统涂菌方法不能达到的平板边缘。同时，可实现多板同时涂布，大大提高实验效率。平板涂布玻璃珠可经反复灭菌，多次使用。
特点：
1. 均匀：菌液涂布均匀。
2. 高效：可实现多板同时涂布。
3. 经济：可反复灭菌，多次使用。
灭菌方法：
玻璃珠经70%的乙醇洗涤后，高温高压灭菌，晾干后使用。
使用方法：
1. 向已加入菌液的固体琼脂平板加入无菌玻璃珠数颗，如9 cm平板每板建议加10粒玻璃珠。
2. 盖好板盖，于超净台表面水平前后、左右各快速晃动平板约10 sec，以达到更佳涂板效果。
注意：当板盖有冷凝水时，应倒掉或晾干板盖上的冷凝水，以防止涂板时污染平板。如需同时涂布多板，可将加有玻璃珠的平板叠在一起，同时晃动涂板。
3. 待琼脂表面菌液干燥时，倒出玻璃珠，盖好板盖，以备后续培养。
注意：平板涂布玻璃珠为无菌包装，请在无菌环境下使用。玻璃珠可反复灭菌，多次使用。

一、模板DNA：PCR反应需要模板DNA，如从细胞、组织、血液中提取DNA等；

二、引物：PCR反应的两个引物，分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域，引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物；

三、dNTPs：PCR反应中需要四种dNTPs，包括脱氧腺苷酸（dATP）、脱氧胸苷酸（dCTP）、脱氧鸟苷酸（dGTP）、脱氧胞嘧啶酸（dTTP），用于细胞分裂、DNA合成         等生物学过程，用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增；

四、Taq DNA聚合酶：PCR反应需要的聚合酶，一般使用Taq聚合酶，还有一些其他种类的聚合酶如PFU、Phusion等，用于扩增DNA链；

五、PCR buffer溶液：对PCR反应具有缓冲作用，调节反应pH，硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛，可增强PCR反应特异性，从而提高反应效率；

六、酶切体系：PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤，常常需要进行酶切操作。

七、MARK:一种分子量标准，用来判别DNA片段大小的工具。

八、DNA纯化试剂盒：用于纯化PCR反应产物；

①Oligo dT
选择Oligo dT时，要求RNA必须有Poly A，所以真核生物的mRNA都适用。适合长链甚至全长mRNA的RT，对RNA样品的质量要求较高，不要有明显的DNA污染、RNA降解和RNA断裂。假如想探索新的mRNA进行RT反应，建议推荐使用Oligo dT引物。使用Oligo dT引物要比随机引物和特异性引物的稳定性要好。
②随机引物
适合各种RNA的RT，尤其适合模板丰度很低的情况（比如某个gene表达量很低）。选择随机引物时，链cDNA合成反应中就是以所有的RNA为模板，然后进行PCR反应时设计引物进行特异性扩增。同时要注意随机引物的量和总RNA量之间的关系，一般建议每5µg总RNA的随机引物的用量为50ng，如果每5µg总RNA的随机引物的用量超过250ng，可能会导致小片段产物（＜500bp）的增加和长片段、全长产物的降低。
③特异性引物
基因特异性引物（GSP）是某个基因序列的一部分，与模板互补的引物。该引物需要结合目标RNA的已知序列进行设计。由于引物和RNA序列特异性结合，每个目标RNA都需要一套新的基因特异性引物。因此，当分析多种目标时，则需要适用更多的RNA样本。而且不同引物退火温度本来就不相同，所以一般不推荐使用。如需要使用特异性引物，建议对退火温度进行优化。