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TRzol(总 RNA 提取试剂)
¥561.6RNase Away 即用型强力 RNase 灭活剂
¥390RNAfixer 无液氮 RNA 样品储存液
¥702RNAlong RNA 长期保存液
¥132.6质粒小量快速提取试剂盒
¥405.6RNAsafe 高效 RNase 灭活剂
¥1060.8高纯度质粒小量快速提取试剂盒
¥592.8RNAclean RNA 清洁纯化试剂盒
¥936病毒基因组 DNA/RNA 快速提取试剂盒
¥1591.2PLANTaid 植物 RNA 助提剂
¥156TRzol LS(液体样本 RNA 提取试剂)
¥1076.40.1-1ml 凝固血基因组 DNA 提取试剂盒
¥1216.8T7 Endonuclease I
货号 | 规格 | 分类 |
XG-P3072 | 250U | 核酸酶系列 |
XG-P3072 | 2500U | 核酸酶系列 |
T7 核酸内切酶 I 识别并切割不配对 DNA、十字型结构 DNA、Holliday 结构或交叉 DNA、异源双链 DNA 或者以更慢的速度切割含切刻的双链 DNA。该酶切割错配碱基 5′ 端的、第二或第三个磷酸二酯。
本产品是通过克隆重组表达 T7 核酸内切酶 I 基因,获得的高纯度蛋白,该酶无其他内切酶或外切酶污染。
活性定义:在 50 μl 反应体系,37℃ 条件下,1 小时将90% 以上的 1 μg 超螺旋十字型结构的 pUC(AT)* 转化成 90% 以上的线性结构所需要的酶量定义为一个活性单位。
应用:
基因突变、SNP、TALEN 或 CRISPR/Cas9 形成的突变体检测识别错配 DNA分解四方向交叉 DNA 或分支 DNA检测或切割异源二聚体 DNA 和切刻 DNA随机切割线性 DNA 进行 shot-gun 克隆1X T7 Endonuclease I Buffer:
50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2 ,1 mMDTT(pH 7.9 @ 25℃)
酶储存液:50 mM Tris-HCl, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1mM EDTA, 50% Glycerol, pH 7.5。
储存:置于-20°C 可保存 2 年,避免反复冻融。
注意事项
(1) T7 核酸内切酶 I 是一种具有底物结构选择性的酶;该酶以不同的活性作用于不同的 DNA 底物。切割特定底物,必须控制酶量和反应时间。
(2)反应温度超过 42℃时,会增加非特异性核酸酶活性。
一、模板DNA:PCR反应需要模板DNA,如从细胞、组织、血液中提取DNA等;
二、引物:PCR反应的两个引物,分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域,引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物;
三、dNTPs:PCR反应中需要四种dNTPs,包括脱氧腺苷酸(dATP)、脱氧胸苷酸(dCTP)、脱氧鸟苷酸(dGTP)、脱氧胞嘧啶酸(dTTP),用于细胞分裂、DNA合成 等生物学过程,用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增;
四、Taq DNA聚合酶:PCR反应需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,还有一些其他种类的聚合酶如PFU、Phusion等,用于扩增DNA链;
五、PCR buffer溶液:对PCR反应具有缓冲作用,调节反应pH,硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛,可增强PCR反应特异性,从而提高反应效率;
六、酶切体系:PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤,常常需要进行酶切操作。
七、MARK:一种分子量标准,用来判别DNA片段大小的工具。
八、DNA纯化试剂盒:用于纯化PCR反应产物;
①Oligo dT
选择Oligo dT时,要求RNA必须有Poly A,所以真核生物的mRNA都适用。适合长链甚至全长mRNA的RT,对RNA样品的质量要求较高,不要有明显的DNA污染、RNA降解和RNA断裂。假如想探索新的mRNA进行RT反应,建议推荐使用Oligo dT引物。使用Oligo dT引物要比随机引物和特异性引物的稳定性要好。
②随机引物
适合各种RNA的RT,尤其适合模板丰度很低的情况(比如某个gene表达量很低)。选择随机引物时,链cDNA合成反应中就是以所有的RNA为模板,然后进行PCR反应时设计引物进行特异性扩增。同时要注意随机引物的量和总RNA量之间的关系,一般建议每5µg总RNA的随机引物的用量为50ng,如果每5µg总RNA的随机引物的用量超过250ng,可能会导致小片段产物(<500bp)的增加和长片段、全长产物的降低。
③特异性引物
基因特异性引物(GSP)是某个基因序列的一部分,与模板互补的引物。该引物需要结合目标RNA的已知序列进行设计。由于引物和RNA序列特异性结合,每个目标RNA都需要一套新的基因特异性引物。因此,当分析多种目标时,则需要适用更多的RNA样本。而且不同引物退火温度本来就不相同,所以一般不推荐使用。如需要使用特异性引物,建议对退火温度进行优化。
施氏油脂线虫PCR试剂盒 | 羊口疮病毒PCR试剂盒 |
桔梗染料法PCR鉴定试剂盒 | 牛肾盂肾炎棒杆菌PCR检测试剂盒 |
CD7分子ELISA试剂盒 | 犬副流感病毒PCR检测试剂盒 |
胞浆型磷脂meiA2-αELISA试剂盒 | 布氏旋毛虫PCR试剂盒 |
疟原虫PCR检测试剂盒 | 鱼腥草探针法PCR鉴定试剂盒 |
尤氏泰勒虫PCR检测试剂盒 | 致病性大肠杆菌PCR检测试剂盒 |
苦杏仁探针法PCR鉴定试剂盒 | 不动杆菌属通用PCR试剂盒 |
人NL63 RT-PCR试剂盒 | 布鲁氏杆菌属通用PCR试剂盒 |
人免疫缺陷病毒型组前病毒PCR试剂盒 | 志贺菌ipaH 基因荧光PCR检测试剂盒(探针法) |
溃疡分枝杆菌PCR检测试剂盒 | 巨细胞病毒PCR检测试剂盒 |
拉沙热病毒PCR检测试剂盒 | 信号传导子及转录激活子3ELISA试剂盒 |
人分枝杆菌PCR试剂盒 | CC趋化因子受体5ELISA试剂盒 |
犬瘟热病毒RT-PCR检测试剂盒 | 阿米洛利敏感钠离子通道蛋白1γELISA试剂盒 |
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