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RNase Away 即用型强力 RNase 灭活剂
¥390RNAfixer 无液氮 RNA 样品储存液
¥702RNAlong RNA 长期保存液
¥132.6质粒小量快速提取试剂盒
¥405.6RNAsafe 高效 RNase 灭活剂
¥1060.8高纯度质粒小量快速提取试剂盒
¥592.8T7 Endonuclease I
¥6242×Taq PCR MasterMix( 不含染料 )
¥3126×Taq PCR MasterMix(purple)
¥39003×Taq PCR MasterMix(purple)
¥46802×Taq PCR MasterMix(purple)
¥2731×Taq PCR MasterMix(purple)
¥62.4通用DNA纯化回收试剂盒
货号 | 规格 | 分类 |
XG-P2736 | 100次 | 核酸纯化 |
保存条件:本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
产品介绍:
在高离序盐存在的情况下,DNA片段选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点:
1特的吸附柱设计,消除了液体残留及污染,并且洗脱体积低可至5μl。
2.使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独的溶胶液/结合液配方,将溶胶和结合两种功能统一,因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况,节省了需购买多种试剂盒的费用。
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到结合效果,大大提高回收效率。
5.可回收50bp-25kb片段,每个吸附柱可吸附DNA量为5μg。
适用范围:
适用于琼脂糖凝胶DNA回收、PCR反应产物纯化回收、酶切产物DNA片段纯化回收、探针标记后纯化回收、DNA样品浓缩等。
一、模板DNA:PCR反应需要模板DNA,如从细胞、组织、血液中提取DNA等;
二、引物:PCR反应的两个引物,分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域,引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物;
三、dNTPs:PCR反应中需要四种dNTPs,包括脱氧腺苷酸(dATP)、脱氧胸苷酸(dCTP)、脱氧鸟苷酸(dGTP)、脱氧胞嘧啶酸(dTTP),用于细胞分裂、DNA合成 等生物学过程,用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增;
四、Taq DNA聚合酶:PCR反应需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,还有一些其他种类的聚合酶如PFU、Phusion等,用于扩增DNA链;
五、PCR buffer溶液:对PCR反应具有缓冲作用,调节反应pH,硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛,可增强PCR反应特异性,从而提高反应效率;
六、酶切体系:PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤,常常需要进行酶切操作。
七、MARK:一种分子量标准,用来判别DNA片段大小的工具。
八、DNA纯化试剂盒:用于纯化PCR反应产物;
①Oligo dT
选择Oligo dT时,要求RNA必须有Poly A,所以真核生物的mRNA都适用。适合长链甚至全长mRNA的RT,对RNA样品的质量要求较高,不要有明显的DNA污染、RNA降解和RNA断裂。假如想探索新的mRNA进行RT反应,建议推荐使用Oligo dT引物。使用Oligo dT引物要比随机引物和特异性引物的稳定性要好。
②随机引物
适合各种RNA的RT,尤其适合模板丰度很低的情况(比如某个gene表达量很低)。选择随机引物时,链cDNA合成反应中就是以所有的RNA为模板,然后进行PCR反应时设计引物进行特异性扩增。同时要注意随机引物的量和总RNA量之间的关系,一般建议每5µg总RNA的随机引物的用量为50ng,如果每5µg总RNA的随机引物的用量超过250ng,可能会导致小片段产物(<500bp)的增加和长片段、全长产物的降低。
③特异性引物
基因特异性引物(GSP)是某个基因序列的一部分,与模板互补的引物。该引物需要结合目标RNA的已知序列进行设计。由于引物和RNA序列特异性结合,每个目标RNA都需要一套新的基因特异性引物。因此,当分析多种目标时,则需要适用更多的RNA样本。而且不同引物退火温度本来就不相同,所以一般不推荐使用。如需要使用特异性引物,建议对退火温度进行优化。
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